Ex-vivo KLM : l’imagerie du tissu en direct pendant l’opération !
Visuel issu de l'article Medica Tradefair - ex vivo KLM
Imaginez la possibilité de zoomer sur les tissus en temps réel durant une opération ? C’est exactement ce que la microscopie confocale à balayage laser ex vivo (KLM) rend possible.
Cette technique d’histologie en temps réel a notamment été testée en dermatologie (voir article des chercheurs allemands en référence). La méthodologie KLM (de l’allemand konfokaler Laserscanmikroskopie) vise à supplémenter l’histologie conventionnelle au moyen d’une imagerie rapide et digitale qui se fait directement sur le tissu : alors que les méthodes conventionnelles requièrent 24 à 48 heures pour la fixation, l’enrobage et la coloration, la microscopie confocale à bayage laser ex vivo délivre en quelques minutes des images de coupe en haute résolution.
La technique
En pratique, cette technologie fonctionne de la manière suivante : les deux lasers scannent le tissu, ce qui fait qu’une image digitale peut être générée en utilisant les signaux obtenus. Ainsi, la microscopie confocale à balayage laser ex vivo fonctionne de telle façon que le tissu n’est pas coupé en fines tranches, mais simplement scanné avec deux lasers différents. Les signaux obtenus de cette façon sont combinés, afin de former une image digitale qui ressemble à la coloration conventionnelle HE, dans laquelle l’hématoxyline colore les noyaux des cellules en bleu-violet et l’éosine marque le cytoplasme en rose. Autre atout de cette méthode : elle ne requiert pas l’utilisation de formol. Les lasers pénètrent jusqu’à 0,2 millimètre de profondeur dans le tissu et capturent même les détails les plus fins, de moins d’un dixième de millimètre de taille. Le résultat est visible sur l’écran en deux à cinq minutes, permettant aux médecins et aux équipes de laboratoire de poursuivre immédiatement leur travail. Les avantages de cette technique sont importants, notamment cette haute résolution digitale sans qu’il y ait de perte de tissu.
Des progrès en perspective
Des limites persistent toutefois aussi, telles que le fait qu’aucune immunohistochimie ne peut se faire durant le scan en direct, ou encore que la pénétration est limitée à une profondeur de 0,2 millimètre. Dans le futur, des algorithmes d’IA pourraient permettre de quantifier rapidement des profils d’épaisseur de la tumeur, ou de déterminer automatiquement l’invasivité de ses cellules. En outre, cette microscopie confocale à balayage laser ex vivo pourrait à l’avenir favoriser aussi la télépathologie et même intégrer des marqueurs immunohistochimiques en temps réel.
En savoir plus
Swarlik A, Deußing M, Hartmann D. Digitale Pathologie mittels ex vivo konfokaler Laserscanmikroskopie [Digital pathology using ex vivo confocal laser scanning microscopy]. Dermatologie (Heidelb). 2025 Mar;76(3):135-139. German. doi: 10.1007/s00105-025-05469-1.
